讓細胞活潑的六大小訣竅
更新時(shí)間:2023-06-15 點(diǎn)擊次數:736
1.保證所有實(shí)驗室材料都無(wú)菌
穿插污染是細胞培育的大敵。即使是輕微的污染,也或許毀了幾個(gè)星期的效果,因培育箱內溫暖濕潤,真菌極易成長(cháng),因而有必要注意定時(shí)清潔。
此外,在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺之前,運用酒精擦拭干凈,以防止污染。
2.選擇上佳的培育基開(kāi)發(fā)策略
在細胞培育進(jìn)程中,培育基是操控產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和本錢(qián)的重要要素。有必要針對每種培育物來(lái)定制培育基,以?xún)?yōu)化實(shí)驗成果,在決定以哪種方法來(lái)開(kāi)發(fā)您的培育基時(shí),您需要考慮時(shí)間和本錢(qián)等要素。
3.在傳代之前不要讓細胞集合
集合度是指貼壁細胞占有培育瓶表面積的份額。集合意味著(zhù)100%的表面都被貼壁細胞覆蓋,一定要防止這種狀況,由于它意味著(zhù)細胞不能繼續成長(cháng)。不過(guò),燃眉之急是運用活潑成長(cháng)的細胞。
4.運用對數成長(cháng)期的細胞
細胞培育進(jìn)程共有3個(gè)階段:停滯期、對數期和平臺期,分別代表了低細胞成長(cháng)、高細胞成長(cháng)和無(wú)細胞成長(cháng),有生機的細胞是健康的,快速分裂的,在對數期以70-80%的集合度存在。
5.在運用前正確解凍細胞
盡管解凍看起來(lái)是個(gè)簡(jiǎn)略的步驟,但有必要操作得當,防止損傷細胞。長(cháng)期暴露在高溫條件下會(huì )使細胞無(wú)法鋪板,因而,凍存管應當在37°C水浴中放置2分鐘,然后用條件培育基稀釋?zhuān)苑乐笵MSO造成直接損傷。
6.小心處理您的培育物
細胞培育的脆弱性怎樣強調也不為過(guò)。劇烈搖晃,或接連的溫度波動(dòng)或許會(huì )對成長(cháng)發(fā)生不利的影響。保證培育箱是水平的,溫度均一,且遠離電動(dòng)儀器。
此外,盡量防止一次處理多個(gè)細胞系,由于它或許會(huì )影響細胞的基因型和表型。