16S+ITS測序的原理和用途
更新時(shí)間:2021-09-01 點(diǎn)擊次數:1836
16S+ITS測序是對特定長(cháng)度的PCR產(chǎn)物或者捕獲的片段進(jìn)行測序,目前主要是應用高通量測序技術(shù)對特定環(huán)境中特定遺傳物質(zhì)進(jìn)行測序。大多數天然微生物都不能通過(guò)傳統的分離培養方法進(jìn)行分離和克隆,這對于天然微生物定性和定量,探索微生物多樣性是嚴重的挑戰。擴增子測序可以克服傳統分離培養的弱點(diǎn),對樣品中的微生物進(jìn)行定性和定量,目前在微生物多樣性檢測中廣泛應用。 16S+ITS測序的原理和用途:
16SrDNA測序:16SrDNA是編碼16SrRNA的基因,存在于所有細菌基因組。其既能體現不同菌屬之間的差異,又能利用測序技術(shù)較容易地得到其序列,目前被廣泛用于病原菌的檢測和鑒定。它的可變區經(jīng)常用于不同微生物群落的屬或種系統進(jìn)化分類(lèi)。
ITS測序:在真核生物中,18SrDNA和28SrDNA轉錄間隔序列稱(chēng)為ITS區。由于其是非轉錄區,承受的選擇壓力較小,變異強;屬于中度保守區域,利用它可研究種及種以下的分類(lèi)階元。
16S+ITS測序技術(shù)優(yōu)勢:
較低的成本:與宏基因組測序相比,對測序深度的要求更低,性?xún)r(jià)比較高;
鑒定效率高:與克隆或培養等傳統鑒定方法相比,微生物群16S/ITS測序是一種更快、更準確的方法。
高靈敏度:可以鑒定出豐度極低的細菌。
雙區檢測:針對一個(gè)或多個(gè)可變區域的靈活性,能夠進(jìn)行更長(cháng)的序列讀取,并能夠對菌落進(jìn)行更準確的分析。